.Em muốn hỏi hình ảnh southern blot (trên màng) thì các band có phải có kích thước bằng nhau và bằng plasmid không ạ. Em xin cảm ơn
outher.
Mình đọc đi đọc lại mà chả hiểu chủ thớt hỏi gì
Em cảm ơn câu trả lời của anh ạ. Nếu cùng 1 dòng thì các băng sẽ có vị trí bằng nhau hả anhChắc ý bạn nói Southern blot của các dòng chuyển gene khác nhau. Tại sao cùng 1 gene mà các băng có vị trí khác nhau là do gene này ở các dòng khác nhau nằm ở các vị trí khác nhau trong hệ gene.
Em muốn hỏi nếu ko liên quan đến kích thước thì vẫn phải có marker để làm gì ạ (huhu đừng ném đá em. em có đọc rồi nhưng kiến thức chung chung quá)Mình cũng chẳng hiểu chủ thớt hỏi gì. Túm lại là lai Southern là lai ADN với probe bản chất ADN có 1 đoạn trình tự giống với gen quan tâm. Band của bạn ở đâu, thì probe dính và hiện mầu ở đó, chẳng liên quan đến kích thước gen của bạn.
Em vừa tải hình ảnh mà ko biết đã được chưa. Băng đầu tiên của em là plasmid, còn các băng khác là của các cây đậu tương chuyển gen kháng sâu. Em cảm ơn anh đã nhiệt tình trả lời giúp em để em có thể hình dung được/ Em còn phải học hỏi nhiều hơn nữa.Bạn hình dung thế này. Bạn chuyển gene vào genome của cây thuốc lá bằng pp agrobacterium. RB và LB sẽ giúp gene của bạn tích hợp vào genome nhưng tại vị trí ngẫu nhiên.
Hình dung 3 vị trí như thế này:
dòng 1: ----------EcoRI---gene---------------EcoRI
dòng 2: ------EcoRI-------gene---EcoRI------------
dòng 3:EcoRI-------------gene---------------EcoRI
Bây giờ bạn cắt genome bằng EcoRI, sau đó chạy gel, rồi blot lên màng Southern. Khi lai bằng probe từ gene của bạn, bạn sẽ được cái màng như thế này
Dòng 1 Dòng 2 Dòng 3
---------------gene
gene---------------
--------gene-------
Kết quả cho thấy khi cắt bằng EcoRI, thì cái fragment của line 2 chứa gene của bạn là ngắn nhất, vì gene của bạn nhảy vào vị trí genome mà 2 vị trí EcoRI nằm gần nhau.