[FONT="]Giả sử bạn đã nhân dòng được một trình tự cADN của sinh vật nhân chuẩn và muốn biểu hiện gen này ở tế bào E. coli. Loại véctơ nào bạn cần sử dụng? Véctơ này phải cần có đặc điểm gì? Véctơ này cần có những cải tiến gì để biẻu hiện được protein trong tế bào động vật có vú?<o></o>[/FONT]
Theo như em được biết thì nếu gen ở sinh vật nhân chuẩn thứ nhất khi biểu hiện thì nên ưu tiên đối với chính sinh vật đó. Nếu không có sinh vật đó thì có thể dùng các loại nhân chuẩn đã được thương mại hóa ví dụ như nấm men chẳng hạn.
Với câu hỏi của anh/chị là biểu hiện ở E.coli thì nên lựa chọn vectơ chuyển gen là plasmid vì nó có kích thước nhỏ ~> phù hợp với E.coli. Đối với plasmid thì phải là plasmid thương mại và có các đặc điểm chính sau:
- Có phần ori tự nhân chính bản thân nó sau khi đưa vào cơ thể
- Có phần để enzyme giới hạn có thể tác dụng nhằm chèn gen cần biểu hiện vào (phần này còn gọi là phần chứa các điểm cắt giới hạn).
- Có gen kháng kháng sinh hay còn gọi là phần nhận biết để phân biệt giữa plasmid có chứa gen và không chứa gen.
Ba yếu tố nói trên là dành cho việc chuyển gen nói chung hay còn gọi là biến nạp. Còn nếu để biểu hiện nữa thì phải có thêm phần promoter, initiator, terminator và điểm bám cho ribosome nhằm đảm bảo cho quá trình phiên mã và dịch mã diễn ra như bình thường.