Anh có thể mô tả thêm về MACS cho mọi người được không ạ? Theo em được biết thì chỗ em hiện tại chưa có cái đấy, còn tương lai thì... không dám đoán.
Em nghĩ FACS sẽ có giá thành rẻ hơn vì chỉ cần fluorescent conjugated Ab bất kỳ đều xài được (Ab này có thể dùng cho cả việc đọc FCS bình thường, VD cùng một loại anti-CD34 vừa được dùng để đếm nồng độ tế bào gốc, sau đó cũng có thể dùng trong việc sorting những tế bào này ra).
MACS theo như bác nói thì có vẻ phụ thuộc vào beads quá nhỉ? Em không chắc là mình hiểu rõ về cơ chế của MACS, nhưng em nghĩ thằng này selecting hơn là sorting, có lẽ khi mình làm việc với một loại marker xác định thì MACS sẽ có ưu thế. Em có hiểu sai gì không ạ?
Với FACS mình có thể lập trình để chỉ nhặt lấy những thằng được khoanh vùng trên dotblot (hoặc gate nhiều tầng, kiểu như hàm nhiều biến) - vì nhiều lúc tế bào cần enriched được đánh dấu bằng nhiều hơn một loại marker, và đôi khi chúng ta chỉ cần những thằng biểu hiện "vừa phải", không quá mạnh. Chưa kể nếu cần ta có thể dùng FACS để gate riêng 2 vùng khác nhau trên dotblot vào 2 ống khác nhau chỉ trong một lần chạy.
Thành vào website của bọn Miltenyi Biotec mà xem chi tiết. Mình attached ở đây cái slide về nguyên lý MACS chuẩn bị từ đợt trước về VN trình bày.
Về cơ bản thì MACS với FACS không khác nhau lắm. Trên lý thuyết thì có thể áp dụng như nhau vì đều dựa vào kháng thể đặc hiệu cho loại tế bào cần tách. FACS thì dựa vào tín hiệu huỳnh quang còn MACS thì dựa vào lực từ, beads nó thay cho cái fluorescence thôi không có gì đáng nói.
Ưu điểm của MACS là giản, cái hạt từ gắn sẵn với kháng thể rồi nên chỉ việc đánh dấu kháng thể rồi cho vào máy (automacs) hoặc cho vào cột từ (xem hình) độ vài phút là xong. Có lẽ FACS rẻ hơn nhưng cần đào tạo tương đối để có thể sorting, và tốn thời gian hơn. Trong nhiều trường hợp không có lợi, nhất là khi cần tách một quần thể tế bào nhỏ trong cả một hỗn hợp lớn, sẽ rất mất thời gian và dễ ảnh hưởng đến sức khoẻ của tế bào.
Về MACS thì tuỳ loại tế bào muốn sorting mà có thể dùng positive selection (dùng đúng 1 loại marker để đánh dấu và thu tế bào gắn với marker đấy) hoặc negative selection (dùng 1 loạt marker gắn với mọi loại tế bào khác trong quần thể trừ tế mà mình cần tách). Cho nên nhiều khi negative selection có ưu điểm là đặc hiệu hơn vì hiện tại chưa ai dám chắc 1 loại marker A chỉ đặc hiệu ở tế bào B, vì ngày càng nhiều subpopulations được xác định, với lại nhiều trường hợp bệnh lý nên marker bề mặt thay đổi biểu hiện này....
Mình làm nhiều với FACS thì thấy việc gating nhiều khi không help lắm, chỉ tương đối thôi. Riêng về MACS thì bọn Miltenyi Biotec đã phát triển quy trình chuẩn cho hầu hết các loại tế bào quan trọng của người cũng như chuột. Thành nên tham khảo, không xài hàng của nó nhưng qua đó có idea về nên dùng antibodies nào để tách loại tế bào nào rồi mình mua Abs về dùng cho FACS. Về thực tế trong bệnh viện thì mình không rõ ở các nước FACS hay MACS chiếm ưu thế, cái này để đi hỏi thêm.